有限稀釋法是一種常用的克隆方法，將需要再克隆的細(xì)胞株自培養(yǎng)孔內(nèi)吸出并作細(xì)胞計數(shù)，計出1mL的細(xì)胞數(shù)。

正文

用HT培養(yǎng)液稀釋，使細(xì)胞濃度為50～60個/mL，于96孔培養(yǎng)板中每孔加0.1mL(五六個細(xì)胞/孔)。接種2排，剩余細(xì)胞懸液用HT培養(yǎng)液作倍比稀釋，再接種2排，如此類推，直至使每孔含0.5～1個細(xì)胞。培養(yǎng)7～10d后，選擇單個克隆生長的陽性孔再一次進(jìn)行克隆。一般需要如此重復(fù)3～5次，直至達(dá)100％陽性孔率時即可，以確?？贵w由單個克隆所產(chǎn)生。