原理應(yīng)用
紫外分析儀是熒光技術(shù)的應(yīng)用,熒光技術(shù)是什么呢?首先了解一下什么是熒光,熒光又作“螢光”,是指一種光致發(fā)光的冷發(fā)光現(xiàn)象。當某種常溫物質(zhì)經(jīng)某種波長的入射光(通常是紫外線或X射線)照射,吸收光能后進入激發(fā)態(tài),并且立即退激發(fā)并發(fā)出比入射光的的波長長的出射光(通常波長在可見光波段);而且一旦停止入射光,發(fā)光現(xiàn)象也隨之立即消失。具有這種性質(zhì)的出射光就被稱之為熒光。知道了什么是熒光,顧名思義就能想到什么是熒光技術(shù)。熒光技術(shù)是某些物質(zhì)受一定波長的光激發(fā)后,在極短時間內(nèi)(10-8秒)會發(fā)射出波長大于激發(fā)波長的光,這種光稱為熒光。這一發(fā)光現(xiàn)象在各方面的應(yīng)用及有關(guān)的方法稱為熒光技術(shù)(fluorescent technique)。
物質(zhì)經(jīng)過紫外線照射后發(fā)出熒光的現(xiàn)象可分為兩種情況,第一種是自發(fā)熒光,如葉綠素、血紅素等經(jīng)紫外線照射后,能發(fā)出紅色的熒光,稱為自發(fā)熒光;第二種是誘發(fā)熒光,即物體經(jīng)熒光染料染色后再通過紫外線照射發(fā)出熒光,稱為誘發(fā)熒光。
熒光技術(shù)在生物化學及分子生物學研究中應(yīng)用主要包括以下幾個方面:
1、物質(zhì)的定性:不同的熒光物質(zhì)有不同的激發(fā)光譜和發(fā)射光譜,因此可用熒光進行物質(zhì)的鑒別。與吸收光譜法相比,熒光法具有更高的選擇性。
2、定量測定:利用在較低濃度下熒光強度與樣品濃度成正比這一關(guān)系可以定量分析樣品中熒光組分的含量,常用于測定氨基酸、蛋白質(zhì)、核酸的含量。熒光定量測定的一個優(yōu)點是靈敏度高,例如維生素B2的測定限量可達1毫微克/毫升,這一優(yōu)點使測定時所需要樣品量大大減少。這種定量測定方法還可應(yīng)用于酶催化的反應(yīng),只要反應(yīng)前后有熒光強度的變化,就可用來測定酶的含量及酶反應(yīng)的速率等。
3、研究生物大分子的物理化學特性及其分子的結(jié)構(gòu)和構(gòu)象:熒光的激發(fā)光譜、發(fā)射光譜、量子產(chǎn)率和熒光壽命等參數(shù)不僅和分子內(nèi)熒光發(fā)色基團的本身結(jié)構(gòu)有關(guān),而且還強烈地依賴于發(fā)色團周圍的環(huán)境,即對周圍環(huán)境十分敏感。利用此特點可通過測定上述有關(guān)熒光參數(shù)的變化來研究熒光發(fā)色團所在部位的微環(huán)境的特征及其變化。在此研究中,除了利用生物大分子本身具有的熒光發(fā)色團(如色氨酸、酪氨酸、鳥苷酸等,此類熒光稱為內(nèi)源熒光)以外,可將一些特殊的熒光染料分子共價地結(jié)合或吸附在生物大分子的某一部位,通過測定該染料分子的熒光特性變化來研究生物大分子,這種染料分子被稱為“熒光探針”,它們發(fā)出的熒光一般稱為外源熒光。熒光探針的應(yīng)用,大大地開拓了熒光技術(shù)在分子生物學中的應(yīng)用范圍。
4、利用熒光壽命、量子產(chǎn)率等參數(shù)可以研究生物大分子中的能量轉(zhuǎn)移現(xiàn)象:通過該現(xiàn)象的研究,可以獲得生物大分子內(nèi)部的許多信息。
以往人們常用熒光偏振做指標來研究生物大分子動力學。人們趨于用熒光偏振隨時間的衰減來研究這些問題。在這種方法中,激發(fā)光不是一連續(xù)的面偏振光,而是一偏振的光脈沖,因此測得的F∥和F是在兩個不同方向上偏振的熒光隨時間的衰減,它既和熒光壽命τ有關(guān),又與分子在溶液中的運動有關(guān),因此常表示為F∥(t)和F⊥(t)。由它們可得一相當重要的物理量——各向異性參數(shù)A(t)。由A(t)可推測生物大分子的形狀、分子轉(zhuǎn)動弛豫時間(即從一個定向的狀態(tài)到一個無定向狀態(tài)所要的時間),進而可以推知生物大分子的大小、分子在溶液中的轉(zhuǎn)動角度和時間之間的函數(shù)關(guān)系。由這些結(jié)果可以研究分子之間的相互作用、分子間結(jié)合的緊密程度、蛋白質(zhì)、核酸分子的解聚程度等等。
另外,熒光技術(shù)在免疫學中亦有廣泛的應(yīng)用。最重要的就是熒光抗體法。將某些熒光染料與血清抗體相結(jié)合,這種標記的抗體仍可專一地與相應(yīng)抗原發(fā)生結(jié)合,形成的復(fù)合體具有熒光特性,從而可以確定抗原或抗體的存在及其含量。
利用熒光技術(shù)設(shè)計的紫外分析儀主要是物質(zhì)的定性方面的應(yīng)用,包括:
⑴在科學實驗工作中檢測,許多主要物質(zhì)如蛋白質(zhì)、核苷酸等。
⑵在藥物生產(chǎn)和研究中,可用來檢查激素生物堿,維生素等各種能;產(chǎn)生熒光藥品質(zhì)量,特別適宜作薄層分析和紙層分析斑點和檢測。
⑶在染料涂料橡膠、石油等化學行業(yè)中,測定各種熒光材料,熒光指示劑及添加劑,鑒別不同種類的原油和橡膠制品。
⑷紡織化學纖維中可測定不同種類的原材料。如羊毛,真絲人造纖維,棉花,合成纖維,并可檢查成品質(zhì)量。
⑸在糧油,蔬菜,食品部門,可用于檢查毒素(如黃曲霉素等),食品添加劑,變質(zhì)的蔬菜、水果、可可豆、巧克力、脂肪、蜂蜜、糖蛋等的質(zhì)量。
⑹在地質(zhì)、考古等部門,可起到發(fā)現(xiàn)各種礦物質(zhì),判別文物化石的真?zhèn)巍?/p>
⑺在公安部門可檢查指紋、測定密寫字跡等。
適用范圍△ 在科學實驗工作中它是檢測許多主要物質(zhì)如蛋白質(zhì)、核苷酸等。
△ 在藥物生產(chǎn)和研究中,可用來檢查激素生物堿,維生素等各種 能產(chǎn)生螢光藥品的質(zhì)量,它特別適宜作薄層分析,紙層分析斑點和 檢測。
△ 在染料涂料橡膠、石油等化學行業(yè)中,測定各種螢光材料,螢光指示劑及添加劑,鑒別不同種類的原油和橡膠制品。
△ 在紡織化學纖維中可以用于測定不同種類的原材料如羊毛、真絲人造纖維、棉花合成纖維,并可檢查成品質(zhì)量。
△ 在糧油、蔬菜、食品部門可用于檢查毒素、(如黃曲霉素等)食品添加劑,變質(zhì)的蔬菜、水果、可可豆肪、巧克力、脂肪、蜂蜜、糖、蛋 00等的質(zhì)量。
△ 在地質(zhì)、考古等部門可起到發(fā)現(xiàn)各種礦物質(zhì)、判別文物化石的真?zhèn)巍?/p>
△ 在公安部門可檢查指痕測定、密寫字跡等。
特點優(yōu)勢1、紫外分析儀(YLN-II型)由紫外線燈管及濾光片組成。UVC 254nm波長,UVA 365nm波長,兩種波長可想互獨立使用,并具有點樣功能。
2、紫外分析儀(YLN-II型)具有消耗功率小,熱量低,可以長時間連續(xù)使用,最大的優(yōu)點是可以隨開隨關(guān)一開即可使用,十分方便。
3、紫外分析儀(YLN-II型)紫外燈燈管發(fā)出的光經(jīng)濾光片濾去可見光,從而為熒光分析提供了強烈的254nm和365nm紫外光。
紫外分析儀 ZW-3型
4、在暗室里,可以通過儀器的點樣功能,粗略估計樣品之間的距離。技術(shù)指標△ 電源:220V,50HZ.
△ 功率:25 W.
△ 紫外線波長:254nm、365nm.
△ 外形尺寸:270×270×300mm.
△ 濾色片:200×50mm
△ 重量:約3 Kg
工作原理采用不同波長的紫外光對DNA、RNA電泳凝膠樣品進行觀察拍照、檢測蛋白質(zhì)、核甘酸、,適用于核酸電泳分析、檢測,PCR產(chǎn)物檢測,DNA指紋圖譜分析,紙層分析或薄層分析等。適用于核酸電泳、熒光的分析、檢測, PCR 產(chǎn)物檢測, DNA 指紋圖譜分析,是開展 RFLP 研究, RAPD 產(chǎn)物分析的理想儀器。本機無需在暗室操作,便可對電泳凝膠進行紫外觀察和照相,也可配備蛋白檢測儀對蛋白進行觀察和照相。紫外強而均勻。可接反射燈等。此產(chǎn)品多次出口。
三用紫外分析儀的使用方法:該儀器設(shè)置三個開關(guān)鍵,分別控制點樣燈,254nm和365nm紫外燈,且相互獨立,當需要某一燈工作時,按下相應(yīng)開關(guān)鍵即可。
紫外分析儀
在科研工作、藥物生產(chǎn)研究、化學、糧油、蔬菜、水果、地質(zhì)、考古、公安等領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用。
型號項目 | ZW-3型 | ZW-7型(暗箱式) |
紫外線波長 | 254nm、365nm |
色片 | 200×50(mm) |
功率 | 25W |
暗箱式分析儀
適用范圍
該儀器是提供白光和紫外光照射的裝置。主要用于蛋白質(zhì)電泳觀察、照相。帶箱內(nèi)照明及相機升降裝置。
結(jié)構(gòu)特點
YLN-II型熒光紫外儀帶有暗箱,無需暗室,可在明室中全天候使用。該儀器下部為白光透射燈箱,白光照度大。箱體上部配備有兩種波長的紫外光源,波長分別為254nm、365nm,燈管啟輝快,無頻閃。抽屜式可見光燈箱。
產(chǎn)品規(guī)格
1. 紫外光源照射窗口有效尺寸應(yīng)不小于:反射190mm×41mm。白光光源透射窗口有效尺寸:238mm×198mm;
2. 紫外光源波長:反射:254nm、365nm;
3. 透紫燈的功率:波長為365nm的紫外燈,功率為28W;波長為254nm的紫外燈,功率為28W;
4. 紫外玻璃透光率:對波長為230nm~400nm的紫外光透過率不小于40%;
5. 各波長的紫外光源的窗口輻照度應(yīng)不小于10μW/cm2;\
6. 外型尺寸(L×W×H)490×360×430(mm);
維護保養(yǎng)
1. 本儀器應(yīng)放置在陰涼、干燥、無灰塵和無酸堿、蒸汽的地方,儀器使用環(huán)境應(yīng)清潔。長時間不用應(yīng)拔下電源插頭,并蓋上防護罩;
2. 不要將水和液體濺到儀器上;
3. 燈箱上放置被觀察物的玻璃如有污穢,可用酒精棉球擦干凈。
照相式分析儀
用途及適用范圍
該儀器是提供紫外光照射的裝置??捎糜诤怂犭娪灸z樣品的觀察、照相等方面,帶紫外防護罩和相機升降裝置。
結(jié)構(gòu)及特點
紫外儀是在暗室中使用的紫外分析儀,該儀器配備三種波長的紫外光源,透射為300nm,反射為254與365nm,您可根據(jù)自己的需要,單獨使用其中某個波長,亦可同時使用幾種波長。本產(chǎn)品選用電子鎮(zhèn)流器,整機重量輕,燈管啟輝快,無頻閃。
規(guī) 格
1. 透紫外光源照射窗口有效尺寸:透射窗:200mm×150mm,反射窗:190mm×41mm;
2. 紫外光源波長:透射:300nm,反射:254nm、365nm;
3. 紫外燈功率:波長為365nm的紫外燈,功率為28W;波長為300nm的紫外燈,功率為8W;波長為254nm的紫外燈,功率為28W;
4. 電源條件:電源電壓:單相正弦交流220V±22V;頻率:50Hz±1Hz;
5. 輸入功率:不大于220VA;
6. 外型尺寸(L×W×H)440 ×340 ×120(mm);
日常維護保養(yǎng)方法
1. 本儀器要放置在陰涼、干燥、無灰塵和無酸堿、蒸汽的地方。
2. 放置被觀察物的紫玻璃和黑板上如有污穢,可用酒精棉球擦干凈。